A tropicamida atua bloqueando as respostas do músculo esfíncter da íris e do músculo ciliar à estimulação colinérgica, resultando na dilatação da pupila (midríase) e na paralisia da acomodação (cicloplegia). A solução oftálmica Mydriacyl® começa a agir entre 15 a 30 minutos após a aplicação, e sua atividade dura aproximadamente de 3 a 8 horas. Em alguns indivíduos, a recuperação da midríase pode demorar até 24 horas. Íris mais pigmentadas podem necessitar de doses maiores em comparação com íris menos pigmentadas.